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承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
毛细管电泳化学发光高灵敏检测诺氟沙星和环丙沙星及其在尿样分析
小类:
生命科学
简介:
本文我们首次发现诺氟沙星和环丙沙星能够显著提高鲁米诺-双氧水的化学发光发光强度,基于这种现象,建立了一种毛细管电泳化学发光高灵敏同时检测诺氟沙星和环丙沙星的新方法。该方法的检出限达到10-12 mol/L,是目前同时检测这两种物质最灵敏的方法之一。提出的新方法成功应用于人尿样中诺氟沙星和环丙沙星的分离分析和环丙沙星在人体中的药代动力学研究。
详细介绍:
诺氟沙星和环丙沙星都属于第二代喹诺酮类抗生素,是一类重要的人工合成的广谱杀菌药物。但是,它们的过量使用会在生物体和环境中引起严重的药物污染。因此,发展一种灵敏快速的方法检测喹诺酮类抗生素的含量,在生化分析中具有重要意义。毛细管电泳是一类以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,以样品的多种特性为依据的高效微分离分析技术,具有分离效率高、样品消耗量低、分析时间短等优点。化学发光检测是最灵敏的检测技术之一,它的仪器简单,不需要任何外加光源。毛细管电泳-化学发光联用技术将同时具有高分离效率和高灵敏度等优点,已成为当今分析化学的研究热点之一。本文我们首次发现诺氟沙星和环丙沙星能够显著提高鲁米诺-双氧水的化学发光发光强度,基于此种现象,建立了一种毛细管电泳化学发光高灵敏同时检测诺氟沙星和环丙沙星的新方法。对毛细管电泳分离和化学发光检测条件的影响进行了系统研究。在优化条件下,诺氟沙星和环丙沙星在4.5分钟内基线分离。诺氟沙星和环丙沙星的检出限(S/N = 3)分别达到2.9 × 10-10和1.1 × 10-12 mol/L,此检出限是目前同时检测这两种物质最灵敏的方法之一;在尿样分析中的定量限(S/N = 10)分别为6.0 × 10-8和5.1 × 10-10 mol/L。两种分析物日内和日间迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别不高于3.6%和6.3%(n = 6)。两种分析物在人尿样中的加标回收率在91.0%和112.7%之间。该方法成功应用于两种分析物在人尿样中的分离分析和环丙沙星在人体中药代动力学的研究。

作品专业信息

撰写目的和基本思路

本文建立一种利用毛细管电泳化学发光联用技术同时检测诺氟沙星和环丙沙星的新方法。对毛细管电泳分离条件和化学发光检测条件进行了系统研究。将提出的新方法应用于人尿样的分离分析和药代动力学的研究。

科学性、先进性及独特之处

毛细管电泳以其高效、快速、取样量少等优越性能,已成为分析化学前沿研究领域。化学发光检测以其灵敏度高、线性范围宽、仪器简单等特点得到广泛的应用。毛细管电泳化学发光联用技术具有高分离效率和高灵敏度的特色,适合于复杂体系的生物样品分析,具有良好的发展前景。本文利用毛细管电泳化学发光联用技术首次同时检测诺氟沙星和环丙沙星并应用于尿样分析。

应用价值和现实意义

此方法可以用来诺氟沙星和环丙沙星的定量分析以及环丙沙星在人体中药代动力学的研究,并在生物体液药物检测和临床分析等方面也有潜在的应用前景。

学术论文摘要

本文首次发现诺氟沙星和环丙沙星能够显著增强鲁米诺-双氧水的化学发光强度。基于这种现象,建立了一种毛细管电泳化学发光高灵敏同时检测诺氟沙星和环丙沙星的新方法。对毛细管电泳的分离条件和化学发光的检测条件的影响进行了系统研究。在优化条件下,诺氟沙星和环丙沙星在4.5 min内实现基线分离。诺氟沙星和环丙沙星的检出限(S/N = 3)分别为2.9 × 10-10和1.1 × 10-12 mol/L,在尿样分析中的定量限(S/N = 10)分别为6.0 × 10-8和5.1 × 10-10 mol/L。两种分析物日内和日间迁移时间相对标准偏差分别不高于2.9% 和4.9%,峰面积相对标准偏差分别不高于4.3%和7.5%。通过加标回收实验,诺氟沙星的加标回收率在96.6-112.7%范围内,环丙沙星的加标回收率在91.0-97.0%之间,相对标准偏差(RSD)不大于7.7%。该方法成功应用于环丙沙星在人体中药代动力学的研究,结果令人满意。

获奖情况

本文英文版已经发表在国际分离科学领域的重要期刊《Chromatographia》上(德国Vieweg Verlag出版,ISSN 0009 -5893); 2010年8月,北京,由国家自然科学基金委、北京大学和清华大学举办的第三届全国生命分析化学学术报告与研讨会的论文集里发表过摘要; 2010年9月,南阳,由河南省化学会举办的河南省化学会2010年学术年会的论文摘要集里发表过摘要; 本文荣获信阳师范学院第八届“挑战杯”大学生学术科技作品竞赛一等奖。

鉴定结果

该同学申报情况真实,同意推荐。

参考文献

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同类课题研究水平概述

已有一些文献报道了检测诺氟沙星和环丙沙星在医药制剂和生物体液中的含量,如液相色谱法、高效液相色谱法、流动注射分析法、分光光度测量法和毛细管电泳法。然而,由于实际样品中干扰物的存在,流动注射分析法和分光光度测量法并不适合喹诺酮类药物在医药制剂和生物体液中的检测。为了避免这些问题,样品需要费时费力的前处理过程(如萃取法、络合法等)。液相色谱法和高效液相色谱法定量分析喹诺酮类药物可以得到令人满意的结果,但是,这些方法样品消耗量高,分析时间长,仪器操作和维护复杂。已报道的毛细管电泳法由于灵敏度不高,造成在实际应用中受到限制。因此,发展一种高灵敏、快速分析生物体液中的喹诺酮类药物的新方法非常重要。
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